紫外可見分光光度計與熒光分光光度計的主要區別有四點：
一、光電倍增管不同，也就是信號探測器不同；
二、工作條件不同，紫外分光光度計測的是分子在紫外光區的吸收強度，熒光分光光度計測的是吸收光能量后處于激發態的分子發出的輻射（即分子熒光）；
三、光源不同，紫外可見分光光度計在紫外區使用氫燈或氘燈,在可見光區使用氘燈或溴鎢燈。它們發出的都是連續光譜，通過三棱鏡（中檔）、光柵（高檔）、濾光片（低級）等分光，這樣兩種燈組合基本涵蓋了紫外可見光的波長范圍；熒光分光光度計由氙弧燈發出的光通過切光器使其變成斷續之光以及激發光單色器變成單色光后，此光即為熒光物質的激發光，被測的熒光物質在激發光照射下所發出的熒光，經過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上；
四、適用條件不同，紫外可見分光光度計可用于大部分有色物質的定量監測，通常需要使用各種各樣的顯色劑；熒光分光光度計可用于測試發光材料的發射光譜＼激發光譜＼時間掃描，不需要顯色劑，靈敏度比紫外-可見分光光度計高2－3個數量級。
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